성과정보

분석법

분석법
관리번호 RS05201701100001
제목 면역형광 기반 세포 내 단백질 상호작용 분석 방법
개발년도 2017년
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저자정보 한은희,민진영,정영호
요약 ∘ 암을 비롯한 여러 질병 유발 기전에 단백질-단백질 상호작용 (protein-protein interaction, PPI)이 직접적으로 관련되어 있으며, 이러한 단백질 사이의 상호작용에 대한 억제를 통해 질병 치료 및 극복을 위한 연구가 진행되고 있음. ∘ 기존의 단백질 결합 분석방법은 생체내에서 일어나는 실제 상호작용과 상이한 정보를 제공하거나 실험의 어려움으로 PPI 저해제 효능에 대한 직접적인 효과를 설명하기 어려움이 있음. 따라서 세포내에서 직접적인 단백질 결합을 확인하는 분석 방법이 필요함. ∘ 면역형광 기반 세포 내 단백질 상호작용 분석 방법 (In situ proximity ligation assay, PLA)은 sigma aldrich 사의 Duolink assay kit을 이용하는 분석법으로 종이 다른 두 표적 단백질의 항체를 세포에 반응시키고 각각 다른 종의 oligonucleotide가 표지된 2차 항체를 붙인 뒤 단백질 상호작용으로 인한 두 단백질의 근접 (close proximity) 거리를 통해 두 항체 사이의 거리가 가깝게 되면 효소 반응으로 적색 형광 spot (PLA signal)이 보이는 것을 공초점현미경으로 촬영하여 두 단백질의 세포내 상호작용을 분석함.
키워드 protein-protein interaction, confocal microscopy, immunofluorescence
관련장비 현미 화상 분석 시스템
참고문헌
연구개발성과
응용분야
분석/공동연구지원
연구분야 BT
적용분야
기술분야 BT
기타참고사항